Ekstraksi, Karakterisasi dan Uji Pengaruh Ekstrak Kuda Laut (Hippocampus comes L.) terhadap Kualitas Sperma, Apoptosis Sel Germinal, Profil Hematologi dan Kimia Darah Tikus Sprague-Dawley yang Diinduksi DMPA

Oleh : Trisnawati, S.Si., M.Kes

 

Infertilitas saat ini menjadi salah satu masalah kesehatan reproduksi dan diperkirakan oleh World Health Organization (WHO) menjadi penyakit terbesar ketiga setelah tumor dan kardiovaskular. Infertilitas dapat terjadi pada satu dari enam pasangan suami istri (pasutri) usia produktif yang disebabkan oleh banyak faktor, salah satunya adalah faktor laki-laki. Infertilitas pada laki-laki juga dipengaruhi oleh berbagai faktor, yaitu gangguan hormon, faktor fisik, penyakit menular seksual, faktor lingkungan dan gaya hidup serta faktor genetik. Salah satu jenis infertilitas pada laki-laki adalah hipogonadisme. Hipogonadisme dapat dipengaruhi faktor hormonal. Gangguan hormonal akibat adanya gangguan poros hipotalamus-hipofisis-testis dalam mengatur konsentrasi hormon yang dapat memengaruhi produksi sperma.

Saat ini pengobatan terhadap masalah infertilitas yang menggunakan produk alami dari alam semakin berkembang dengan mengeksplorasi manfaat bahan alam, baik flora ataupun fauna. Salah satu fauna yang berpotensi adalah kuda laut (Hippocampus spp.). Dari berbagai penelitian yang telah dilakukan, sampai saat ini belum ada laporan tentang pengaruh ekstrak kuda laut jenis Hippocampus comes L. terhadap infertilitas. Padahal jenis ini termasuk yang paling banyak populasinya di Indonesia dan telah banyak digunakan sebagai obat tradisional (alami) secara turun-temurun oleh masyarakat.

Penggunaan obat baik berbahan dasar dari alam ataupun obat kimiawi haruslah dapat dipastikan tingkat keamanannya. Keamanan suatu obat yang dikonsumsi perlu diperhatikan, salah satunya dengan pemeriksaan profil hematologi dan kimia darah. Profil hematologi penting untuk menilai komponen seluler, sedangkan kimia darah digunakan untuk mengevaluasi komponen yang terdapat dalam cairan darah. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk mengkarakterisasi ekstrak kuda laut Hippocampus comes L. dan mengetahui bagaimana pengaruhnya terhadap kualitas sperma, kadar hormon testosteron, apoptosis sel kelamin, profil hematologi, kimia darah dan berat badan tikus yang diinduksi hipogonad.
Kuda laut yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu jenis Hippocampus comes L. berasal dari hasil budidaya dan alam dan diekstraksi menggunakan pelarut etanol dan air. Penelitian diawali dengan pembuatan serbuk kuda laut menggunakan grinder dan kemudian dilakukan analisis proksimat. Selanjutnya dilakukan proses ekstraksi menggunakan metode maserasi dan karakterisasi ekstrak meliputi nilai rendemen, golongan senyawa, kandungan asam amino dan golongan steroid.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar proksimat cenderung lebih tinggi pada kuda laut yang berasal dari alam. Karakterisasi ekstrak diperoleh hasil bahwa kuda laut mengandung alkaloid, triterpenoid, asam amino esensial dan nonesensial, glikosida steroid dan nilai rendemen ekstrak yang juga cenderung lebih tinggi pada kuda laut dari alam dengan pelarut air. Hasil ini digunakan sebagai acuan untuk penggunaan ekstrak kuda laut yang diujikan pada hewan coba.

Penelitian kemudian dilanjutkan dengan uji menggunakan hewan coba yang terdiri atas tiga puluh ekor tikus jantan galur Sprague-Dawley yang diinduksi hipogonad dengan Depo Medroksiprogesteron Asetat (DMPA) pada minggu ke-0 dan ke-12. Tikus secara acak dibagi dalam kelompok perlakuan yang dicekok dengan akuades, CMC 1%, dan ekstrak kuda laut pada dosis yang berbeda yang dimulai pada minggu ke-7. Perlakuan hewan coba dilakukan selama 18 minggu, dan diakhir penelitian semua tikus diterminasi dengan ketamin dan xylazine untuk segera diambil darah, jaringan testis dan air mani dari vas deferen untuk dilakukan pengamatan terhadap parameter kualitas sperma, kadar hormon testosteron, apoptosis sel kelamin, profil hematologi, kimia darah dan berat badan tikus.

Analisis data menunjukkan bahwa parameter kualitas sperma dan kadar hormon testosteron pada kelompok tikus yang diberikan ekstrak kuda laut cenderung meningkat dibandingkan dengan kelompok yang tidak diberi ekstrak kuda laut. Evaluasi terhadap proses apoptosis sel kelamin menunjukkan kecenderungan penurunan apoptosis pada kelompok yang mendapat ekstrak kuda laut, namun tidak memengaruhi profil hematologi, kimia darah dan berat badan tikus yang diinduksi hipogonad.
Simpulan yang diperoleh dari hasil penelitian ini menunjukkan bahwa kuda laut Hippocampus comes L. berpotensi sebagai bahan alam yang memiliki manfaat terhadap kualitas sperma, peningkatan hormon testosteron, penurunan apoptosis sel kelamin, dan tidak memengaruhi profil hematologi dan kimia darah serta berat badan pada tikus yang diinduksi hipogonad. Namun, perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan mengeksplorasi manfaat kuda laut terhadap biomarkah sel dan molekul secara komprehensif sehingga dapat digunakan dalam pengembangan potensi kuda laut sebagai salah satu Marine Natural Products (MNPs) yang dapat meningkatkan nilai tambah kuda laut Hippocampus comes L. sebagai salah satu keanekaragaman hayati Indonesia dalam bidang industri obat.

 

Extraction, Characterization and Test Effect of Seahorse Extract (Hippocampus comes L.) on Sperm Quality, Germinal Cell Apoptosis, Hematological Profile and Blood Chemistry of DMPA-Induced Sprague-Dawley Mice

By : Trisnawati, S.Si., M.Kes

 

Infertility is currently a reproductive health problem and is estimated by the World Health Organization (WHO) to be the third largest disease after tumors and cardiovascular disease. Infertility can occur in one in six married couples (couple) of productive age caused by many factors, one of which is the male factor. Infertility in men is also influenced by various factors, namely hormonal disorders, physical factors, sexually transmitted diseases, environmental and lifestyle factors as well as genetic factors. One type of infertility in men is hypogonadism. Hypogonadism can be influenced by hormonal factors. Hormonal disorders due to disruption of the hypothalamic-pituitary-testis axis in regulating hormone concentrations that can affect sperm production.

Currently, the treatment of infertility problems using natural products from nature is growing by exploring the benefits of natural materials, both flora, and fauna. One of the potential fauna is the seahorse (Hippocampus spp.). From various studies that have been carried out, until now there has been no report on the effect of Seahorse extract of Hippocampus comes L. on infertility. This species is among the most populous in Indonesia and has been widely used as traditional (natural) medicine for generations by the community.

The use of drugs made from natural or chemical drugs must ensure the level of safety. The safety of a drug that is consumed needs to be considered, one of which is by examining the hematological profile and blood chemistry. Hematological profiles are important for assessing cellular components, while blood chemistry is used to evaluate components present in blood fluids. Therefore, this study aimed to characterize the extract of the seahorse Hippocampus comes L. and determine how it affects sperm quality, testosterone levels, sex cell apoptosis, hematological profile, blood chemistry, and body weight of hypogonadal-induced rats.
The seahorses used in this study, namely the type Hippocampus comes L. derived from cultivation and nature and were extracted using ethanol and water as solvents. The study began with the manufacture of seahorse powder using a grinder and then carried out a proximate analysis. Furthermore, the extraction process was carried out using the maceration method and the characterization of the extract included the yield value, compound class, amino acid content, and steroid group.

The results showed that the proximate levels tended to be higher in seahorses that came from nature. The characterization of the extracts showed that the seahorse contained alkaloids, triterpenoids, essential and non-essential amino acids, and steroid glycosides and the yield value of the extracts also tended to be higher in seahorses than in natural water solvents. These results are used as a reference for the use of seahorse extract tested on experimental animals.

The study was then continued with a test using experimental animals consisting of thirty male Sprague-Dawley rats induced by hypogonadal with Depo Medroxyprogesterone Acetate (DMPA) at weeks 0 and 12. Mice were randomly assigned to treatment groups that were fed with distilled water, 1% CMC, and seahorse extract at different doses starting at week 7. The experimental animals were treated for 18 weeks, and at the end of the study, all rats were terminated with ketamine and xylazine for immediate blood, testicular, and semen collection from the vas deferens to observe sperm quality parameters, testosterone levels, sex cell apoptosis, hematological profile, blood chemistry and body weight of mice.

Data analysis showed that the parameters of sperm quality and testosterone levels in the group of rats given seahorse extract tended to increase compared to the group that was not given seahorse extract. Evaluation of the apoptotic process of sex cells showed a tendency to decrease apoptosis in the group that received seahorse extract but did not affect the hematological profile, blood chemistry, and body weight of hypogonadal-induced mice.
The conclusions obtained from the results of this study indicate that the seahorse Hippocampus comes L. has the potential as a natural ingredient that has benefits on sperm quality, increased testosterone hormone, decreased sex cell apoptosis, and did not affect hematological and blood chemistry profiles and body weight in induced mice. hypogonadal. However, further research is needed to explore the benefits of seahorses on cell and molecular biomarkers comprehensively so that it can be used in developing the potential of seahorses as one of the Marine Natural Products (MNPs) that can increase the added value of the seahorse Hippocampus comes L. as one of Indonesia’s biodiversity in the medicinal industry.

 

Ready to Help You